Πρόβατα O.FMDV-O Ab

Πρόβατα κατά του ορότυπου O για ασθένειες του αφθώδους στόματος Ταχεία δοκιμή αντισωμάτων (O.FMDV-O Ab)

Αριθμός καταλόγου: JIO604

Εισαγωγή:

Ο αφθώδης πυρετός είναι μια εξαιρετικά μεταδοτική ιογενής νόσος που προσβάλλει τα δίχηλα-πήλατα, συμπεριλαμβανομένων των βοοειδών, των προβάτων, των χοίρων και των κατσικιών. Προκαλεί σημαντικές οικονομικές απώλειες λόγω απωλειών παραγωγής, εμπορικών περιορισμών και προσπαθειών εξάλειψης. Η ασθένεια προκαλείται από επτά ορότυπους του ιού του αφθώδους πυρετού (FMDV), οι οποίοι εμφανίζουν αντιγονική ποικιλομορφία. Ο ορότυπος O FMDV είναι ο πιο κοινός παγκοσμίως και προκαλεί την πλειοψηφία των εστιών αφθώδους πυρετού. Η ταχεία και ακριβής διάγνωση της νόσου και ο ορότυπος είναι ζωτικής σημασίας για την επιτήρηση της νόσου, τη διαχείριση της επιδημίας και την πρόληψη. Σε αυτό το πλαίσιο, διατίθενται διάφορες διαγνωστικές δοκιμασίες για την ανίχνευση FMDV, αλλά δεν είναι όλες κατάλληλες για ταχεία, ευαίσθητη και ειδική ανίχνευση συγκεκριμένων ορότυπων. Η ταχεία δοκιμή αντισωμάτων για τις ασθένειες του αφθώδους στόματος Ovine Anti-ορότυπου O είναι μια νέα διαγνωστική ανάλυση που θα μπορούσε να ξεπεράσει αυτούς τους περιορισμούς. Αυτή η ανασκόπηση στοχεύει να παράσχει μια επισκόπηση των αρχών, των μεθόδων και των πιθανών εφαρμογών της ταχείας δοκιμής αντισωμάτων για ασθένειες του αφθώδους στόματος Ovine Anti-ορότυπου O.

Αρχή:

Η ταχεία δοκιμή αντισωμάτων για ασθένειες του αφθώδους στόματος των προβάτων κατά-ορότυπου O είναι μια ανοσοχρωματογραφική ανάλυση που χρησιμοποιεί μια μορφή ανοσοδοκιμασίας πλευρικής ροής (LFIA). Η δοκιμή χρησιμοποιεί μονοκλωνικά αντισώματα κατά του ορότυπου O FMDV (mAbs) που είναι ακινητοποιημένα σε μια μεμβράνη νιτροκυτταρίνης στη ζώνη δοκιμής. Τα mAbs είναι ειδικά για την πρωτεΐνη VP1 του ορότυπου O FMDV. Η ζώνη ελέγχου περιέχει αντισώματα κουνελιού κατά-κατσίκας που συνδέονται με το IgG κατσίκας, το οποίο χρησιμοποιείται ως συζευγμένος έλεγχος. Το σύζευγμα είναι κατσικίσιο αντι-προβειο IgG επισημασμένο με κολλοειδή σωματίδια χρυσού που λειτουργούν ως γεννήτρια σημάτων. Το δείγμα (ορός ή πλάσμα) αραιώνεται και αναμιγνύεται με το συζυγές και το μείγμα προστίθεται στο επίθεμα δείγματος. Το συζυγές μεταναστεύει με το δείγμα κατά μήκος της μεμβράνης νιτροκυτταρίνης και συναντά τα ακινητοποιημένα mAbs. Εάν το δείγμα περιέχει ειδικά αντισώματα για O FMDV-, αυτά θα συνδεθούν στο σύζευγμα, σχηματίζοντας ένα σύμπλεγμα αντιγόνου-αντισώματος. Το σύμπλεγμα θα συλληφθεί από τα ακινητοποιημένα mAbs στη ζώνη δοκιμής, υποδεικνύοντας ένα θετικό αποτέλεσμα. Το μη δεσμευμένο σύζευγμα θα συνεχίσει να μεταναστεύει στη ζώνη ελέγχου, όπου συνδέεται με τα αντισώματα αντι-κατσίκας κουνελιού, σχηματίζοντας μια ροζ-μωβ γραμμή που επιβεβαιώνει την εγκυρότητα της δοκιμής.

Μέθοδος:

Το τεστ Αντισωμάτων Αντισωμάτων κατά του ορότυπου Ovine Anti-ορότυπου O Foot and Mouth Diseases είναι ένας απλός και εύκολος--προσδιορισμός που δεν απαιτεί εξελιγμένο εξοπλισμό ή εξειδικευμένη εκπαίδευση. Η δοκιμή μπορεί να πραγματοποιηθεί σε-ιστοτόπο ή επιτόπου, επιτρέποντας την ταχεία και έγκαιρη διάγνωση. Τα ακόλουθα βήματα περιγράφουν το πρωτόκολλο δοκιμής:

1. Συλλέξτε ένα δείγμα αίματος από το ζώο για το οποίο υπάρχει υποψία μόλυνσης από FMDV χρησιμοποιώντας μια αποστειρωμένη βελόνα και σύριγγα.

2. Μεταφέρετε το δείγμα αίματος σε ένα απλό σωλήνα ή δοχείο και αφήστε το να πήξει σε θερμοκρασία δωματίου.

3. Φυγοκεντρήστε το δείγμα στις 3000 rpm για 10-15 λεπτά για να διαχωριστεί ο ορός ή το πλάσμα από τον θρόμβο.

4. Μεταφέρετε τον ορό ή το πλάσμα σε ένα καθαρό σωληνάριο ή δοχείο και χρησιμοποιήστε το για τη δοκιμή.

5. Ανοίξτε το κιτ δοκιμής και αφαιρέστε τη συσκευή δοκιμής από τη θήκη αλουμινίου.

6. Προσθέστε 3 σταγόνες αραιωτικού δείγματος στο φρεάτιο δείγματος της συσκευής δοκιμής χρησιμοποιώντας την πιπέτα που παρέχεται.

7. Προσθέστε 2 σταγόνες από το δείγμα δοκιμής (ορό ή πλάσμα) στο πηγαδάκι του δείγματος.

8. Προσθέστε 2 σταγόνες του συζυγούς στο πηγαδάκι του δείγματος.

9. Ερμηνεύστε τα αποτελέσματα μετά από 10-15 λεπτά επώασης σε θερμοκρασία δωματίου.

10. Καταγράψτε τα αποτελέσματα ως θετικά, αρνητικά ή άκυρα ανάλογα με την παρουσία ή την απουσία ροζ-μωβ γραμμών στις ζώνες ελέγχου και δοκιμής.

Εφαρμογές:

Η ταχεία δοκιμή αντισωμάτων για ασθένειες του αφθώδους πυρετού των προβάτων κατά-οροτύπου O προορίζεται για την ανίχνευση αντισωμάτων κατά του-ορότυπου O FMDV σε δείγματα ορού και πλάσματος από πρόβατα και αίγες. Η δοκιμή θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί για διάφορες εφαρμογές, όπως:

1. Επιτήρηση ασθενειών: Η δοκιμή μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον εντοπισμό ζώων που έχουν εκτεθεί στον ορότυπο Ο FMDV και για την αξιολόγηση του επιπολασμού και της κατανομής της νόσου σε έναν πληθυσμό.

2. Διερεύνηση εστίας: Το τεστ μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την επιβεβαίωση της διάγνωσης του FMDV και του ορότυπου Ο, τον εντοπισμό της πηγής μόλυνσης και την παρακολούθηση της αποτελεσματικότητας των μέτρων ελέγχου.

3. Παρακολούθηση εμβολιασμού: Το τεστ μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την αξιολόγηση της ορολογικής απόκρισης στον εμβολιασμό και την αξιολόγηση της ανάγκης για αναμνηστικό εμβολιασμό.

4. Εμπόριο: Η δοκιμή μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να αποδειχθεί η απουσία αντισωμάτων FMDV του ορότυπου O σε ζώα που προορίζονται για εξαγωγή ή εισαγωγή, διευκολύνοντας έτσι το εμπόριο και αποτρέποντας την εξάπλωση της νόσου.

Σύναψη:

Το τεστ αντισωμάτων αντισωμάτων για ασθένειες του αφθώδους στόματος των προβάτων κατά-ορότυπου O είναι ένα πολύτιμο διαγνωστικό εργαλείο για την ταχεία και ακριβή ανίχνευση αντισωμάτων κατά του ορότυπου O FMDV σε πρόβατα και κατσίκες. Η δοκιμή βασίζεται σε μια απλή και αξιόπιστη μορφή LFIA που μπορεί να χρησιμοποιηθεί στο πεδίο ή στο εργαστήριο χωρίς την ανάγκη εξειδικευμένου εξοπλισμού ή τεχνογνωσίας. Το τεστ θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί για την επιτήρηση ασθενειών, τη διαχείριση επιδημιών, την παρακολούθηση του εμβολιασμού και τη διευκόλυνση του εμπορίου. Η ευαισθησία, η ειδικότητα και η αναπαραγωγιμότητα του τεστ πρέπει να επικυρωθούν περαιτέρω σε διαφορετικούς πληθυσμούς και συνθήκες για να διασφαλιστεί η βέλτιστη απόδοσή του.