Τι χρησιμοποιεί τα κιτ ELISA
Jun 25, 2019
Η ELISA βασίζεται στη στερεοποίηση αντιγόνων ή αντισωμάτων και ενζυμικών δεικτών αντιγόνων ή αντισωμάτων. Τα αντιγόνα ή τα αντισώματα που είναι δεσμευμένα στην επιφάνεια του φορέα στερεάς-φάσης εξακολουθούν να διατηρούν την ανοσολογική τους δραστηριότητα και τα επισημασμένα με ένζυμα-αντιγόνα ή αντισώματα διατηρούν τόσο την ανοσολογική όσο και την ενζυμική τους δραστηριότητα. Κατά τον προσδιορισμό, το υπό εξέταση δείγμα (το αντίσωμα ή το αντιγόνο σε αυτό) αντιδρά με το αντιγόνο ή το αντίσωμα στην επιφάνεια του φορέα στερεάς{{4} φάσης. Το σύμπλοκο αντισώματος αντιγόνου που σχηματίζεται στον φορέα στερεάς{{6} φάσης διαχωρίζεται από άλλες ουσίες στο υγρό με μέθοδο πλύσης. Το αντιγόνο ή αντίσωμα, το οποίο στη συνέχεια προστίθεται με ενζυμικούς δείκτες, συνδυάζεται επίσης στον φορέα στερεάς φάσης με αντίδραση. Αυτή τη στιγμή, η ποσότητα του ενζύμου στη στερεά φάση είναι ανάλογη με την ποσότητα της υπό εξέταση ουσίας στο δείγμα. Μετά την προσθήκη του υποστρώματος της ενζυμικής αντίδρασης, το υπόστρωμα καταλύεται από το ένζυμο ως έγχρωμο προϊόν, η ποσότητα του προϊόντος σχετίζεται άμεσα με την ποσότητα της υπό εξέταση ουσίας στο δείγμα, επομένως μπορεί να είναι ποιοτική ή ποσοτική ανάλυση ανάλογα με το βάθος χρώματος. Λόγω της υψηλής καταλυτικής αποτελεσματικότητας του ενζύμου, τα αποτελέσματα της ανοσολογικής απόκρισης μεγεθύνονται έμμεσα, γεγονός που καθιστά τη μέθοδο μέτρησης εξαιρετικά ευαίσθητη.
Η ELISA μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον προσδιορισμό αντιγόνων, καθώς και αντισωμάτων. Ωστόσο, υπάρχουν πολλοί παράγοντες που επηρεάζουν τα αποτελέσματα του πειράματος Elisa, επομένως η ενίσχυση της διασφάλισης ποιότητας κάθε συνδέσμου μπορεί να δώσει πλήρη εφαρμογή στα μεθοδολογικά του πλεονεκτήματα.

